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2022
5-7在4月28日開播的“常見細胞污染類型及解決方法”課程中，有很多老師就細胞污染提出了疑問。我們篩選出部分代表性問題，并作了詳細解答。01Q：在細胞培養液中，有種可以游動的蟲子是什么污染？A：是細菌污染。帶鞭毛的細菌就是會游動的。02Q：有很多黑點，在原位顫抖，沒那么明顯的定向運動，是什么污染？A：細胞碎片、血清沉淀和有些細菌污染，都會在原位顫抖。前者是原地做不規律的布朗運動，細菌是原地轉動，頻率會高很多。03Q：血清的絮狀物雜質屬于正常現象嗎？A：血清里面有一些大分子蛋白和一些...
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4-29常溫運輸過程中，細胞不免受到震蕩和溫度變化的影響，出現皺縮、聚團甚至脫落的現象。遇到這種情況，不用緊張，只要正確處理，細胞就能恢復正常生長。收貨時皺縮常溫細胞收貨后，把細胞放進細胞培養箱靜置2-4小時即可。如果4小時后細胞仍然沒有鋪展開，密度適中的前提下可以靜置過夜（過夜前倒出部分培養基，留5-10mL在瓶中，瓶蓋擰松）。收貨時聚團常溫細胞收貨后，先把細胞放進細胞培養箱靜置2-4小時以穩定狀態，再進行傳代。傳代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。收貨時脫落常...
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4-24凡混入細胞培養環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為污染，細胞污染不能*被消除，但能減少其發生的頻率和后果的嚴重性。本文將簡要介紹幾種常見的細胞污染類型及處理方法。常見污染類型細菌污染特征：大小在0.5~5μm，比動物細胞小很多。多呈球狀或桿狀，形態規則，分布均勻；增殖速度快，一般污染后48~72小時爆發式增殖；營養消耗快，培養基很快變黃，變渾濁；鏡下觀察有明顯的定向運動。處理方法：輕度污染可用10X雙抗清洗處理，重度污染建議消殺后丟棄。真菌污染特征：呈鏈球狀...
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4-22體外培養大鼠海馬神經元細胞細胞周期有限；建議使用與procell配套的專用生長培養基和正確的操作方法進行培養，以保證細胞處于理想培養狀態。procell實驗室分離的大鼠海馬神經元細胞采用胰蛋白酶消化、神經元特異性培養基培養、篩選結合化學試劑抑制制備。細胞總數約為5×105個細胞/瓶。大鼠海馬神經元細胞培養和傳代流程（請嚴格按照無菌操作）：1、從原培養瓶中吸出培養基，用PBS緩沖液潤濕細胞兩次，加入2-3ml025%胰蛋白酶消化細胞（注意消化時間，一般控制在1-2min內）；2...
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4-21293[HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉染的人胚腎細胞形成的永生化細胞，293[HEK-293]細胞包含并表達轉染的Ad5基因。早期報道中指出，293[HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側端和右側端的DNA，但是現在明確了只存在其左側端的DNA。經過對Ad5的插入點的克隆測序發現，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293[HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293[HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主...
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4-14在普諾賽3月30日開播的細胞培養直播課堂中，有很多同學提出各種疑問。我們篩選出具有代表性的問題，并作了詳細解答。01動物細胞怎么鑒定？要根據實驗的目的以及細胞類型進行選擇。如果是人源細胞系，并且有文獻或數據庫公布對應細胞信息，則進行STR鑒定即可；如果使非人源的細胞系，可以進行種屬鑒定，并且附加一個研究方向相關的指標進行驗證，部分小鼠細胞也可以做STR鑒定，但目前數據庫不*，很多都沒有匹配數據。對于原代細胞，如果能夠確保取材無誤，僅進行特異性指標方面的檢測就可以了，方法可采用...
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4-12胎牛血清是實驗室常用的天然培養基，但不能直接使用。無論是存儲還是使用，都比較復雜。血清的常規處理是熱鈍化，即置于56°水浴中30分鐘；其目的是使血清中的補體成分和一些未知的細胞生長抑制分子失活。實驗表明，大多數細胞不需要經過正確處理后的熱滅活血清。經過這樣的處理，血清只能輕微促進細胞的生長，或者根本沒有作用。即使是高溫處理通常也會影響血清的質量并降低細胞的生長速度。熱處理過的血清會顯著增加沉淀物的形成。在倒置顯微鏡下觀察時，這些沉淀物，如“小黑點”，常常使研究人員誤認為血清被...
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4-7雞卵泡顆粒細胞分離、培養實驗步驟：A.翅下靜脈注射2mLEDTA-2Na(W/V，2%)溶液處死母雞，新潔爾滅消毒液浸泡消毒5min，打開腹腔，剪取整個卵巢，小心剝離卵泡(以8-15g為最佳)，置于裝有PBS緩沖液的無菌培養皿中；B.用加有雙抗的PBS緩沖液沖去血污，漂洗3次；將漂洗干凈的卵泡移入裝有預冷PBS緩沖液的平皿中，剝凈卵泡外膜、結締組織及血管網；C.用手術刀在卵泡表面劃一道1-2cm長的切口(動作要快)，釋放卵黃，用PBS緩沖液將剩余的卵黃液漂洗干凈，剩下的卵泡膜...
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