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神經科學研究新工具:干粉培養基在Neuro-2a細胞分化中的應用實測

更新時間:2025-05-21  |  點擊率:644
Neurobasal-A神經元干粉培養基一種專為神經細胞培養設計的基礎培養基,適用于新生和成年腦神經元的長期維持和成熟,廣泛應用于神經科學研究領域?。Neurobasal-A神經元干粉培養基適用于大多數神經元細胞應用,特別是新生和成體腦神經元的長期維持和成熟。它可以在不添加膠質細胞飼養層的情況下,長期和短期地維持神經細胞的同源群落的存活。
Neurobasal-A神經元干粉培養基成分說明
形態粉末
L-谷氨酰胺
D-葡萄糖4500 mg/L
丙酮酸鈉25 mg/L
HEPES緩沖劑2600 mg/L
酚紅指示劑8.1mg/L
儲存條件2-8℃ 密閉、避光
運輸條件常溫
有效期36個月
Neurobasal-A神經元干粉培養基配置方法
1. 配制用水應使用純化水、超純水或注射用水,配制過程中水溫應控制在20-30℃。
2. 于配制容器中加入90%配制體積的配制用水(如需配制1 L則這里加900 mL配制用水),開啟培養基配制容器的混合系統(建議混合系統單位體積輸入功率大于10 W/m3),充分攪拌,攪拌時應避免氣泡的產生。
3. 根據所需配制體積,計算所需粉末質量,按照12.92 g/L比例稱取粉末培養基(如需配制1 L則需稱取12.92 g粉末)。將準確稱的培養基干粉加入到步驟【2】的配制容器中,充分攪拌20 min以上,直至粉末完-全溶解;
4. 待溶液完-全澄清后,根據配制體積,按照2.2 g/L比例稱取碳酸氫鈉(分析純)粉末,緩慢加入到步驟【3】的溶液中,繼續攪拌5-10 min至溶解;
5. 加配制用水將完-全溶解的步驟【4】溶液精確定容至100%配制體積(如需配制1 L則定容至1 L)。
6. 測量pH值,必要時用1 mol/L氫氧-化鈉溶液或1 mol/L鹽酸溶液調整pH值至7.20-7.30;由于過濾會使培養基pH值稍微偏高,因此此處比目的pH值(7.20-7.40)要低一些。
7. 用孔徑為0.2 μm的濾膜正壓過濾除菌(注意無菌操作)。
8. 過濾結束可以取少許液體培養基進行菌檢,待合格后再使用。
9. 過濾后的培養基液體應立即使用或存放于玻璃瓶、培養基瓶(PET)或具有隔氧涂層的一次性儲液袋中,2-8℃避光保存,此時液體培養基保質期為1年。
Neurobasal-A神經元干粉培養基注意事項
1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作;
2. 為保持本產品的最佳使用效果,請務必按照建議的儲存條件進行保存;
3. 產品僅供科學研究或進一步生產使用,不可用于臨床診斷或治療。

Neurobasal-A神經元干粉培養基常見問題


Q:單獨的 Neurobasal-A培養基或添加了 B-27 添加劑的 Neurobasal 培養基能否冷凍以延長產品保質期?

A:不建議冷凍培養基,因為解凍時可能會形成沉淀;配方中的無機鹽和氨基酸在溫度波動時可能會從溶液中析出,這些沉淀一旦形成,就不容易再回到溶液中。

Q:我可以添加什么補充劑到Neurobasal-A培養基中來培養我的神經細胞?

A:可以添加B-27補充劑(不含維A,PB180638)來培養神經干細胞;培養海馬神經元和其他神經元細胞可添加B-27(含維A,PB180637)或N-2添加劑(PB180641);用于原代膠質細胞、星形膠質細胞、星型膠質表型的腫瘤細胞系(星形膠質細胞和膠質瘤)的培養,可以使用G-5添加劑(PB180640)。

Q:Neurobasal-A干粉培養基制備液體培養基過程中需要控溫多少呢?

A:溶解的溫度控制在室溫即可也就是20-30℃。

Q:Neurobasal-A干粉培養基為什么要額外添加碳酸氫鈉,不能提前加在干粉里配制時直接溶解嗎?

A:細胞培養基中的碳酸氫鈉(NaHCO3)通常并不包含在干粉形式的培養基內,而是作為單獨的成分,在配制培養基溶液的過程中另外添加。主要原因包括:1. 碳酸氫鈉在一定條件下容易分解,并且對二氧化碳敏感,如果預先混入干粉培養基中,可能會影響其穩定性并導致有效成分失效。2. 由于不同實驗室的二氧化碳濃度以及操作者配制時的具體條件(例如溫度、時間)可能不同,因此在最終配制液體培養基時才加入碳酸氫鈉,可以根據實際需求調整其濃度,以確保培養基達到理想的pH值。3. 將碳酸氫鈉獨立存儲還可以方便運輸和長期儲存干粉培養基,因為碳酸氫鈉受潮后可能引起結塊,影響其溶解性能。


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